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明膠酶譜分析試劑盒操作要領(lǐng)

更新時間:2019-05-28      瀏覽次數(shù):1483

明膠酶譜分析試劑盒操作要領(lǐng)!

上海信帆生物供應(yīng)明膠酶譜分析試劑盒,操作簡單方便,可以同時檢測MMP2和MMP9的活性,操作方法和免疫印跡相類似。

操作要領(lǐng):

1.制備聚丙烯酰胺時應(yīng)注意排除氣泡。

2.明膠酶譜的活性受鈣離子,鋅離子,和PH值等因素的影響,因此緩沖液配制應(yīng)嚴格準確,盡量用超純水,孵育溫度也掌握好。

3.用大梳子。

4.孵育液的PH在7.5-7.6,復(fù)性的TRITON時間長了會有絮狀物,所以實驗時盡量使用新鮮配置的。

5.孵育的37度不要在CO2培養(yǎng)箱中,因為會改變孵育液的PH值,在普通孵箱即可。

6.明膠要4度保存,配好后1周內(nèi)使用。

7.樣本活性低可以延長孵育時間到48小時

MMP檢測注意事項:細胞培養(yǎng)基要用無血清培養(yǎng)基;樣本裂解時不含EDTA,明膠酶譜的活性受鈣離子,鋅離子,和PH值等因素的影響,因此緩沖液 配制應(yīng)嚴格準確,盡量用超純水,孵育溫度也掌握好。因為檢測蛋白活性,所以應(yīng)盡量避免蛋白變性,一般都要求冰上操作,電泳也放在冰水里進行的。

附上一張明膠酶譜試劑盒的條帶圖

明膠酶譜分析試劑盒操作要領(lǐng)

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