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精華篇:明膠酶譜分析試劑盒跑電泳的時候有什么注意事項

更新時間:2019-06-12      瀏覽次數(shù):2033

精華篇:明膠酶譜分析試劑盒跑電泳的時候有什么注意事項

很多老師在使用明膠酶譜試劑盒的時候電泳總是跑不好,要么是時間很短,要么是跑不開等,今天我們把跑電泳的幾個注意事項分享給大家。

1、跑電泳的時候,每一塊小膠電流為20 mA/gel,如果您跑2塊,增加到30mA左右,膠的數(shù)量增加,電流也需要增加,一般需要跑3-6小時,慢慢壓。

2、恒流了 電壓就是自動的了

3、明膠跑的蛋白是非變性的

4、配的下層膠孔徑稍大

5、跑的時候多跑會兒,條帶之間拉得開些,為作圖時給各條帶添加文字留出足夠的空間。

 

做明膠酶譜法實驗的其他注意事項:

1.制備聚丙烯酰胺時應(yīng)注意排除氣泡。

2.明膠酶譜的活性受鈣離子,鋅離子,和PH值等因素的影響,因此緩沖液配制應(yīng)嚴格準確,盡量用超純水,孵育溫度也掌握好。

3.用大梳子

4.孵育液的PH在7.5-7.6,復(fù)性的TRITON時間長了會有絮狀物,所以實驗時盡量使用新鮮配置的。

5.孵育的37度不要在CO2培養(yǎng)箱中,因為會改變孵育液的PH值,在普通孵箱即可。

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