阿利新藍(lán)-茜素紅胎鼠染色實(shí)驗(yàn)檢測服務(wù)介紹

服務(wù)介紹：

阿利新藍(lán)-茜素紅染色（Alcian Blue-Alizarin Red Staining）是一種常用于胚胎或胎鼠骨骼發(fā)育研究的組織化學(xué)染色方法。該技術(shù)可以同時(shí)染色軟骨和骨組織，使軟骨呈現(xiàn)藍(lán)色，骨組織呈現(xiàn)紅色，從而清晰地區(qū)分兩者，便于觀察骨骼發(fā)育的形態(tài)和過程。

染色原理：

1、阿利新藍(lán)（Alcian Blue）：

阿利新藍(lán)是一種陽離子染料，能夠與酸性多糖（如軟骨中的硫酸軟骨素和透明質(zhì)酸）結(jié)合，使軟骨組織呈現(xiàn)藍(lán)色。

2、茜素紅（Alizarin Red）：

茜素紅是一種陰離子染料，能夠與鈣離子結(jié)合，使鈣化的骨組織呈現(xiàn)紅色。 

實(shí)驗(yàn)步驟

1. 樣本準(zhǔn)備

取胎鼠（通常為胚胎期或新生鼠），去除皮膚和內(nèi)臟，保留骨骼。用固定液（如95%乙醇或4%多聚甲醛）固定樣本，通常固定24-48小時(shí)。

2. 染色

阿利新藍(lán)染色：將樣本放入阿利新藍(lán)染液中（通常為0.1%阿利新藍(lán)溶于酸性乙醇或醋酸緩沖液），染色6-24小時(shí)。染色后，用酸性乙醇（如1%鹽酸乙醇）脫色，直至軟骨呈現(xiàn)清晰的藍(lán)色。

茜素紅染色：將樣本放入茜素紅染液中（通常為0.1%茜素紅溶于蒸餾水或堿性溶液），染色2-4小時(shí)。染色后，用蒸餾水洗滌樣本，去除多余染料。

3. 透明化處理

將樣本依次放入梯度乙醇（如70%、95%、100%）中脫水。

使用透明劑（如甘油、苯甲醇或苯甲酸芐酯）透明化樣本，使骨骼結(jié)構(gòu)更清晰可見。

4. 觀察與保存

將樣本置于透明溶液中（如甘油或苯甲醇），在顯微鏡下觀察。可拍照記錄染色結(jié)果，樣本可長期保存于透明溶液中。

注意事項(xiàng)：

1、染色時(shí)間：染色時(shí)間需根據(jù)樣本大小和發(fā)育階段調(diào)整，避免染色過深或過淺。

2、脫色處理：阿利新藍(lán)染色后需充分脫色，以免影響茜素紅染色效果。

3、透明化：透明化處理需逐步進(jìn)行，避免樣本變形或損壞。

4、樣本選擇：胎鼠的發(fā)育階段需根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇，通常選擇骨骼發(fā)育關(guān)鍵期