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ELISA 樣本處理的注意事項

更新時間:2015-04-17      瀏覽次數(shù):1324

每個標本量收集體積= 50ul × 檢測種類,如要做復孔,標本量收集體積= 50ul × 檢測 種類×2 。

 對于作某一個具體指標來說,先用一系列稀釋度作一批標本測定,得出對實驗有意義 的一個稀釋度(即測定劑量反應曲線),然后用一個zui適稀釋度測定即可。

         收集標本前必須清楚要檢測的成份是否足夠穩(wěn)定。對收集后當天進行檢測的標本,儲存在

4  備用,如有特原因要周期集標,時分裝放在 -20   -70  

件下保免反。標本 2 -8  可保存 48 時, -20  可保存 1 。 -70 

可保存 6 個月。部分激素類標本需添加抑肽酶。

血清標本采集時,應注意避免溶血,紅細胞溶解時會釋放出具有過氧化物酶活性的物質(zhì),  HRP 為標記的 ELISA 測定中,溶血標本可能會增加非特異性顯色。

      為了保證尿液檢測結(jié)果的準確性,必須正確收集尿液標本和保存。盛尿容器要清潔干燥。

使用一次性的容器(如塑料尿杯),避免因用藥并清洗不干凈而造成的污染,影響檢 測結(jié)果。尿液標本必須新鮮,留取后,應及時檢測或保存,以免細菌繁殖。因在室溫中久 置后(尤其是夏季)尿中磷酸鹽等可析出結(jié)晶而干擾檢測。

標本宜在新鮮檢測。如有細污染,菌體含有內(nèi)性HRP會產(chǎn)假陽性應。 保存過久可發(fā)生聚合在 ELISA 中可使本底加深。

凍結(jié)標本融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應充分混勻宜輕緩,避免氣泡,可上下顛 倒混和,不要在混勻器上強烈振蕩

     混濁或有沉淀的標本應先離心或過濾,澄清后再檢測。

反復凍融會使蛋白效價降低,所以待測標本如需保存作多次檢測,宜少量分裝冰存。也可 加入適當防腐劑

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