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更新時間:2025-10-10      瀏覽次數(shù):1615

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標題《lncRNA LUCAT1對膀胱癌細胞增殖、凋亡的影響及其機制研究》

摘要:目的探討lncRNA LUCAT1對膀胱癌細胞的增殖和凋亡的影響以及潛在的作用機制。方法培養(yǎng)正常膀胱上皮細胞SV-HUC-1和膀胱癌細胞J82、5637、BIU-87,將膀胱癌細胞5637隨機分為control組、si-NC組,si-LUCAT1組、pcDNA-NC組、pcDNA-LUCAT1組、si-LUCAT1+anti-miR-NC組、si-LUCAT1+anti-miR-493-5p組。qRT-PCR法檢測miR-493-5p和LUCAT1表達水平;Western Blot檢測蛋白表達;MTT法檢測細胞活性;流式細胞術(shù)檢測細胞凋亡;雙熒光素酶報告實驗驗證LUCAT1和miR-493-5p的靶向關(guān)系。結(jié)果與膀胱上皮細胞SV-HUC-1相比,膀胱癌細胞J82、5637、BIU-87中LUCAT1的表達水平明顯升高,miR-493-5p表達水平明顯降低,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05);與si-NC組相比,si-LUCAT1組細胞活性降低,凋亡率升高,CyclinD1

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  細胞凋亡是細胞的基本特征之一,在機體的胚胎發(fā)育、組織修復(fù)、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定等方面都起到十分重要的作用。Annexin V 是一種分子量為35.8 KD 的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白,能與細胞凋亡過程中翻轉(zhuǎn)到膜外的磷脂酰絲氨酸(Phosphatidylserine, PS)高親和力特異結(jié)合。FITC-Annexin V 結(jié)合到凋亡細胞后,在藍色光的激發(fā)下,發(fā)出綠色熒光,區(qū)分出凋亡細胞與正常細胞。碘化丙啶(Propidium iodide,PI)是一種核酸染料,它不能穿透完整細胞膜,但對凋亡晚期細胞和死細胞的破損細胞膜能夠穿透,并使細胞核紅染。將FITC-Annexin V 與PI 匹配使用,可以將凋亡早期的細胞和晚期的細胞區(qū)分開來。

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