明膠酶譜法試劑盒操作簡(jiǎn)單，靈敏度高。上海信帆生物供應(yīng)的MMP試劑盒采用酶譜法（zymography）檢測(cè)MMP-2、MMP-9活性。Zymography是一種廣為使用的、基于SDS-PAGE電泳和反相凝膠染色的蛋白酶檢測(cè)方法，其靈敏度可達(dá)1 nM，高于ELISA方法,而且可檢測(cè)幾百個(gè)樣本。

 

　　基質(zhì)金屬蛋白酶MMP2/MMP9明膠酶譜試劑盒，其中脫色液配方：冰醋酸:甲醇:水＝7:5:88（V:V:V），很多老師不明年這里面的冰醋酸是什么，我們今天給大家講解一下。這個(gè)冰醋酸不是醋酸也不是乙酸，冰醋酸也叫冰乙酸，就是純的無(wú)水乙酸。不過(guò)我們選擇常規(guī)的98%乙酸也是可以的。

 

　　明膠酶譜法試劑盒細(xì)胞樣本應(yīng)該如何處理：細(xì)胞樣本用PBS，5倍體積震蕩裂解,估算細(xì)胞的體積，然后加入5倍體積的PBS，渦旋振蕩15-30s,而后靜置或低速離心?；蛘呤謩?dòng)震蕩。明膠酶譜法試劑盒采用酶譜法(Zymography)檢測(cè)MMP-2、MMP-9活性。Zymography是一種廣為使用的、基于SDS-PAGE電泳和反相凝膠染色的蛋白酶檢測(cè)方法，其靈敏度可達(dá)1 nM，高于ELISA方法，其基本原理和程序是：制備加有膠原酶底物的SDS-PAGE凝膠，含蛋白酶的樣品在此凝膠中進(jìn)行電泳，電泳結(jié)束后取出凝膠與酶反應(yīng)Buffer孵育，凝膠染色與脫色。凝膠中由于含底物蛋白而被深染，形成深色背景，但在有蛋白酶條帶的位置，蛋白酶將降解凝膠中的底物蛋白，因而不被染色而形成透亮區(qū)域，從而能同時(shí)指示MMP-2、MMP-9的大小位置(酶譜)及活性。本試劑盒提供MMP-2、MMP-9特異蛋白底物及酶學(xué)反應(yīng)緩沖液，可檢測(cè)少至0.1~0.5μl血液中的MMP-2、MMP-9酶譜及活性，檢測(cè)靈敏度~1nM。試劑盒可進(jìn)行50次標(biāo)準(zhǔn)小膠檢測(cè)，如果小膠加樣孔為10~15個(gè)，則總計(jì)可檢測(cè)500~750個(gè)樣品。